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小鼠羧化不全骨鈣素(ucOC)ELISA試劑盒操作流程

日期:2020-12-03瀏覽:1508次

小鼠羧化不全骨鈣素(ucOC)ELISA試劑盒操作流程:
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿(mǎn)洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

為了減小過(guò)失,是先稀釋再加樣。而針對(duì)這位客戶(hù)所遇到的疑問(wèn),我公司技術(shù)人員是這樣說(shuō)明的:
1. 前者測(cè)的是稀釋和移液的過(guò)失,后者只需移液過(guò)失。
2. 一般都是稀釋一次,分兩孔吧。同濃度的分復(fù)孔。
3. 由于是從同一原液稀釋?zhuān)话悴豢紤]稀釋過(guò)失(稀釋過(guò)失是存在的),都是稀釋到想要的倍數(shù)直接分孔(而不是逐個(gè)稀釋?zhuān)@樣可以使稀釋過(guò)失減小)。
4. 復(fù)孔是為了掃除移液體積,板的影響,以及其他系統(tǒng)過(guò)失的,要求復(fù)孔的濃度是一起的。稀釋后分孔能滿(mǎn)意此要求,逐個(gè)稀釋不能。

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