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進(jìn)口ELISA試劑盒的檢測精度的提升是有技巧的

日期:2022-01-25瀏覽:1056次

 
  進(jìn)口ELISA試劑盒是一種敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好的ELISA試劑盒,其試劑安穩(wěn)、易保留、操作簡練、作用區(qū)分客觀等要素,適宜于大規(guī)模篩查實驗又能夠用于少數(shù)標(biāo)本的檢查,能夠做定性實驗也能夠做定量分析。
  試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被人心型脂肪酸結(jié)合蛋白(h-FABP)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人心型脂肪酸結(jié)合蛋白(h-FABP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
  進(jìn)口ELISA試劑盒提高檢測精度:
  一、操作前仔細(xì)閱讀進(jìn)口elisa試劑盒說明書
  嚴(yán)格依照說明書要求進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化操作。不同批號的試劑不混合。值得改善的是,只有經(jīng)過重復(fù)的試驗,如洗盤的數(shù)量,才能加以改善。
  二、點(diǎn)評試劑的實用性
  試劑的穩(wěn)定性對準(zhǔn)確度非常重要。在啟用ELISA試劑盒之前,應(yīng)重復(fù)檢測陰性和陽性對照品和樣品,試劑僅在試劑符合要求后才能運(yùn)用。
  三、檢驗技術(shù)人員應(yīng)具備試驗室操作的基本素質(zhì)和實踐經(jīng)驗
  測技術(shù)人員可以熟練操作試驗儀器儀表,具有一定的總結(jié)和分析問題的才能,能及時、妥善地處理ELISA試劑盒試驗中呈現(xiàn)的意外狀況。
  四、加樣要準(zhǔn)確、快速
  樣品添加的不準(zhǔn)確度和酶制劑用量的不確認(rèn)度直接影響顯色效果。此外,顯色深度和A值的確認(rèn)與顯色劑和終液體的參加量有關(guān),因而樣品的裝載應(yīng)謹(jǐn)慎。需要在一定時間內(nèi)完成采樣的試驗,假如采樣速度慢,會呈現(xiàn)差錯,試劑會露出很長時間,特別是當(dāng)室溫過高時,保質(zhì)期會縮短乃至失效。
  五、嚴(yán)控ELISA試劑盒試驗反應(yīng)時間
  進(jìn)口elisa試劑盒反應(yīng)時間過長,酶被滅活,反應(yīng)時間過短,酶與血清中的微生物抗原和抗體不能*結(jié)合,產(chǎn)物結(jié)構(gòu)松懈不穩(wěn)定,易清洗,易產(chǎn)生假陰性。
  六、洗刷要*
  洗版不*,酶偶聯(lián)物的布景顏色為假陽性。此外,清潔劑應(yīng)該是新鮮的,可以隨時運(yùn)用。舊的洗刷劑會添加布景,也可能呈現(xiàn)假陽性。

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