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狐貍源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒實驗步驟

日期:2022-03-17瀏覽:1025次

狐貍源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒實驗步驟:


典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應組成一個循環(huán),通過多次循環(huán)反應,使目的DNA得以迅速擴增。其主要步驟是:


將待擴增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;


人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補結(jié)合,兩個引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴增片段的長短;


耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因為模板從5’→3’方向延伸,合成DNA的新互補鏈。

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