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共價(jià)結(jié)合型果膠(CSP)含量可見(jiàn)分光光度?法測(cè)定步驟

日期:2024-03-26瀏覽:609次

共價(jià)結(jié)合型果膠(CSP)含量可見(jiàn)分光光度法測(cè)定步驟:


1.加樣


1. 除包被外都需45度加樣


2.加樣體積要準(zhǔn)確


3.管底加樣,不能加在管壁上


4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡


2.溫浴


1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。


2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。


3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。


4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。


3.洗滌


1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。


2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。


4.讀板


1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般可采用目視比色。


2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。


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