看同性男aa片,久久精品99国产精品日本,日本无码sm凌虐强制m字开腿,亚洲欧美中文日韩v在线

歡迎訪問上海研生實(shí)業(yè)有限公司網(wǎng)站

返回首頁|聯(lián)系我們

全國統(tǒng)一服務(wù)熱線:

15201736385
技術(shù)文章您當(dāng)前的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 大鼠骨骼肌組織提取物實(shí)驗(yàn)報(bào)告

大鼠骨骼肌組織提取物實(shí)驗(yàn)報(bào)告

日期:2024-09-09瀏覽:1089次

大鼠骨骼肌組織提取物實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,后將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。


上一篇:PCR檢測試劑盒的步驟是什么呢?

下一篇:小鼠心鈉肽ELISA檢測試劑盒組成及試劑配制

在線客服 聯(lián)系方式 二維碼

服務(wù)熱線

021-59989018

掃一掃,關(guān)注我們

国产性生交XXXXX免费| 99热在线观看| 中国大陆高清aⅴ毛片| 一女被两男吃奶玩乳尖| 少妇无套内谢久久久久| 爆乳2把你榨干哦ova在线观看 | 欧美一区二区三区放荡人妇| 熟妇与小伙子matur老熟妇e| 瑜伽裤国产一区二区三区| 久久精品无码一区二区三区免费| xxxx18一20岁hd| 国产免费AV片无码永久免费| 肉大捧一进一出免费视频| 插我一区二区在线观看| 欧美黑人又粗又大的性格特点| 激情亚洲一区国产精品| 狠狠色噜噜狠狠狠狠AV不卡| 亚洲精品无码| 成人h视频在线观看| 亚洲av片不卡无码久久| 亚洲国产精品成人综合色在线| 国产欧美日韩一区二区加勒比| 吃瓜黑料视频永久地址| 最近中文字幕免费MV视频| 亚洲成av人影片在线观看| 免费在线黄色电影| 蜜桃成人免费视频在线播放 | 255是多少码的鞋子男| jealousvue成熟50ma| 国产精品9999久久久久| 中文人妻熟女乱又乱精品| 高清中文字幕在线a片| 精品一区二区久久久久久久网站| 最近的2019免费中文字幕| 亚洲综合区图片小说区| 欧美日韩一区二区| 高清无码色大片中文| barazza厨房乱战| 一夜强开两女花苞| 肉yin荡公厕肉便调教车ac| 亚洲av无码久久|